Elf1在胃癌组织中的表达及其临床意义

【摘要】  　　目的 探讨转录因子Elf?1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理学特征的关系。方法 采用免疫组织化学染色的方法检测70例胃癌组织及相应的癌旁组织、远癌黏膜组织中Elf?1的表达，分析Elf?1表达与胃癌及其临床病理特征的关系。结果 Elf?1在胃癌、癌旁组织、远癌黏膜组织中表达的阳性率分别为88.6%、55.7%、5.0%，Elf?1在胃癌中的表达率明显高于癌旁组织及远癌黏膜组织，差异有显著性（Hc=70.11,P<0.01）；Elf?1在胃癌中的表达与分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移有关（Hc=-4.81～19.62，P<0.01）。结论Elf?1与胃癌的发生及发展有关，检测Elf?1的表达水平对于胃癌早期诊断及预后评估具有重要参考价值。 
【关键词】  Elf?1 癌基因 胃肿瘤 免疫组织化学 医学职称论文发表 医学论文发表网 医药论文发表 医学论文发表网站 医学论文发表期刊
　　［ABSTRACT］ Objective To investigate the expression of Elf?1 in human gastric carcinoma and its relation to clinical patho?logy. Methods Elf?1 expressions in cancer tissue and adjacent and distal mucosa, in 70 cases, were investigated by immunohistochemistry. The relationship between the expressions and the pathological characters was analyzed. Results The positive expressions of Elf?1 in  the cancer,adjacent tissues and distal mucosa were 88.6%,55.7%, and  5.0%, respectively, the difference between them being significant (Hc=70.11,P<0.01). Elf?1 expression was correlated with differentiation, staging, depth of invasion and lymph node metastasis (Hc=－4.81-19.62,P<0.01). Conclusion Elf?1 is involved in tumorigenesis and progression of gastric cancer. The detection of Elf?1 is of great reference in an early diagnosis and prediction of prognosis of gastric carcinoma.
    
　　［KEY WORDS］ Elf?1; Oncogenes; Stomach neoplasm; Immunohistochemistry
    
　　Elf?1是ETS转录家族中的一员，与发育过程、细胞有丝分裂激活、肿瘤生成和病毒基因激活等有关[1]。有研究结果表明，Elf?1可与多种基因的启动子结合，促进血管发育，与肿瘤的生长和浸润关系密切[2,3]。在高分化前列腺癌、乳癌、骨肉瘤和子宫内膜癌中Elf?1均有较高的表达[4～7]，但与胃癌的关系尚未见报道。本研究采用免疫组化PV 9000法检测Elf?1在胃癌、癌旁组织及远癌黏膜中的表达，探讨其与胃癌及其临床病理特征的关系。
　　1  材料与方法
　　1.1  材料
    
　　随机选取青岛大学医学院附属医院 2006～2007年间外科施行胃癌根治术标本 70例，所有病例术前均未接受化疗和放疗。标本均取有癌组织及癌旁组织，其中40例取有远癌黏膜组织（离肿瘤5 cm以上）。标本经 40 g/L甲醛固定，常规石蜡包埋，4 μm 厚切片，苏木精?伊红（HE）染色，证实为胃腺癌。其中男 49例，女 21例，年龄 27～80(平均59)岁。Borrmann分型Ⅰ型3例，Ⅱ型47例，Ⅲ型11例，Ⅳ型9例；低分化腺癌45例，中高分化腺癌25例；浸润深度在黏膜下层及以上9例，肌层18例，浆膜及以下43例；淋巴结转移者 47例，淋巴结无转移者 23例；临床分期Ⅰ～Ⅱ期36例，Ⅲ～Ⅳ期34例。
　　1.2  方法
    
　　采用免疫组化PV 9000二步法，操作按说明书进行，其中Elf?1 为美国Santa cruz 公司产品, 效价1∶150。阴性对照省略Ⅰ抗，以PBS代替；阳性对照采用已知阳性片，按说明步骤操作。
　　1.3  结果判定标准
    
　　Elf?1阳性染色为棕黄色, 颗粒状，主要定位于细胞核，少量位于胞质。参照文献[8]制定免疫组化标准: 随机选取5个不重复的高倍视野（400倍），每个高倍视野计数1 000个癌细胞，根据阳性反应的染色强度和阳性细胞百分数的得分之和进行评估。①染色强度记分：无染色0分，淡黄色1分，棕黄色2分，深棕黄或棕褐色3分。②阳性细胞百分数： 0分为无阳性细胞，<25%为1分，25%～75%为2分，>75%为3分。根据强度记分和阳性细胞百分数记分相加所得总分判断为：0 分为阴性(-),1～2分为弱阳性(+), 3～ 4 分为中阳性(?), 5～6 分为强阳性(?)。
　　1.4  统计学处理
    
　　应用统计软件SPSS 11.5软件包进行秩和检验，成组设计两样本均数比较采用Wilcoxon法，多个样本均数比较采用Kruskal?Wallis法，两两比较采用Nemenyi法。P<0.05为差异有显著性。
　　2  结果
　　2.1  Elf?1在胃癌、癌旁及远癌组织中的表达
    
　　本文70例胃癌中有64例胃癌组织Elf?1呈阳性表达,其阳性率为88.6%，相应癌旁组织中为55.7%，40例远癌黏膜中阳性率为5.0%。3组比较差异有显著统计学意义（Hc=70.11,P<0.01）。胃癌组织中Elf?1的表达强度明显高于相应的癌旁组织及远癌黏膜(q=7.22、17.93，P<0.05)，癌旁组织中Elf?1的表达强度明显高于远癌黏膜(q=17.38，P<0.05)。见表1。
　　2.2  Elf?1表达强度与胃癌临床病理特征的关系
    
　　Elf?1在胃癌组织中的表达强度与其分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移明显相关（Hc=-4.81～19.62,P<0.01）；与病人性别、Borrmann分型无关。见表2。
　　3  讨论
    
　　胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤，它的形成是多基因参与、多步骤发生的复杂过程，与癌基因的激活、抑癌基因的失活、突变密切相关。Ets转录因子家族作为最大的信号依赖转录调控因子家族之一，在肿瘤发生、发展中起重要作用，特别是在肿瘤的浸润转移中起调控作用。Ets家族有30多个成员，已有研究显示，Ets家族的重要成员Ets?1的表达与胃癌、子宫内膜癌、胰腺癌、肝细胞性肝癌及前列腺癌等的发生、转移显著相关；Elf?3在食管癌、肺癌和宫颈上皮癌等的发生中起重要作用；Elf?1在高分化前列腺癌[4]、乳癌[5]、骨肉瘤[6]和子宫内膜癌[7]中均有较高的表达。Elf?1是T淋巴细胞转录因子，最早从人类T细胞文库中通过用编码人类Ets?1 cDNA的DNA结合域探针杂交而成[8]，染色体定位于13q33。作为Ets转录因子家族中的一员，Elf?1介导细胞的增殖、分化和恶性变，该因子过度表达和许多人类肿瘤的发生、发展及浸润转移有密切关系。TAKAI等[10,11]用荧光免疫组化法研究子宫内膜癌与正常子宫内膜、卵巢癌与良性卵巢囊腺瘤组织中Elf?1的表达情况显示，Elf?1在正常子宫内膜和良性卵巢囊腺瘤组织中表达阴性或弱阳性，在子宫内膜癌和卵巢癌中高表达，且与肿瘤的临床分期、病理分级及淋巴结转移密切相关。研究显示，Elf?1 能促进肿瘤细胞浸润和转移, 且其表达度与浸润深度、恶性程度呈正相关[11]。表1  Elf?1在胃癌及癌旁组织、远癌粘膜表达（略） 
    
　　表2  Elf?1基因表达与胃癌临床病理因素的关系（略）
　　本实验结果显示，Elf?1在远癌黏膜中表达阴性或弱阳性，在胃癌中呈现高表达，表达强度明显高于癌旁组织及远癌黏膜（P<0.01），而在癌旁组织的表达强度又显著高于远癌黏膜组织（P<0.01），表明Elf?1在胃癌中的表达是一个渐进的过程，推测Elf?1在肿瘤的发生过程中起作用。本实验结果还显示，Elf?1的表达与胃癌的分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移有关，与Elf?1在其他几种恶性肿瘤中表达的研究结果相似,提示Elf?1在癌组织中的表达与胃癌的演进和预后有关。
    
　　综上所述， Elf?1在胃癌中表达的研究，对于在分子生物学层面探讨胃癌发生、发展及浸润、转移机制将会具有重要的参考价值，对胃癌的早期诊断、预后评估具有重要的临床意义。
【参考文献】
  　　[1]BREDEMEIER EMST I, NORDHEIM A, JANKNECHT R. Transcriptional activity and constitutive nuclear localization of the Ets protein Elf?1[J]. FEBS Lett, 1997,408(1): 47?51.
　　[2]GASPAR J, THAI S, VOLAND C, et al. Opposing functions of the Ets factors NERF and ELF?1 during chicken blood vessel development[J]. Arterioscler Thromb Vasc Bid, 2002,22(7):1106?1112.

　　[3]HUANG X, BROWN C, NI W, et al. Critical role for the Ets transcription factor ELF?1 in the development of tumor angiogenesis[J]. Blood, 2006,107(8):3153?3160.

　　[4]GAVRILOV D, KENZIOR O, EVANS M, et al. Expression of urokinase plasm inogen activator and receptor in conjunction with the ets family and AP?1 complex transcription factors in high grade prostate cancers[J]. Eur J Cancer, 2001,37(8):1033?1040.

　　[5]SCOTT G K, CHANG C H, ERNY K M, et al. Ets regulation of the erbB2 promoter[j]. Oncogene, 2000,19:6490?6502.

　　[6]BASSUK A G, ARTON K P, ANANDAPPA R T, et al. Expression pattern of the Ets?related transcription factor Elf?1[J]. Mol Med, 1998,4:392?401.

　　[7]TAKAI N, UEDA T, NISHIDA M, et al. The relationship between oncogene expression and clinical outcome in endometrial carcinoma[J]. Curr Cancer Drug Targets, 2004,4(6):511?520.

　　[8]JUANG Y T, SOLOMOU E E, RELLAHAN B, et al. Phosphorylation and O?Linked glycosylation of Elf?1 leads to its translocation to the nueleus and binding to the promoter of the TCR zeta?chain[J]. The Journal of Immunology, 2002,168:2865?2871.

　　[9]THOMPSON C C, BROWN T A, MC KNIGHT S L. Con?vegrenee of Ets and noteh?related structural motifs in a heteromeric DNA binding complex[J]. Science, 1991,253,762?768.

　　[10]TAKAI N, MIYAZAKI T, NISHIDA M, et al. The significance of Elf?1 expression in epithelial ovarian carcinoma[J]. Int J Mol Med, 2003,12(3):349?354.

　　[11]TAKAI N, MIYAZAKI T, NISHIDA M, et al. Clinical relevancen of Elf?1 overexpression in endometrial carcinoma[J]. Gynecol Oncol, 2003,89(3):408?413.