苦荞提取物对小鼠胃肠运动双向调节作用的实验研究
2011年4月25日 17:12 作者:论文网苦荞麦(Buckwheat)属蓼科双子叶植物,俗称苦荞,又称为靼鞑麦F.tataricum。是一种独特的食药两用资源作物。苦荞麦的药用我国医书多有记载。《本草纲目》记载,苦荞麦性味苦、平、寒,实肠胃,益气力,续精神,利耳目,能练五脏滓秽,降气宽肠,磨积滞,消热肿风痛,除万浊,脾积泄泻等功效。《备急千金要方》《群芳谱·谷谱》《齐民要术》等都有苦荞麦治病之说。能治疗痢疾、咳嗽、水肿、喘息、烧伤、胃痛、消化不良、腰腿疼痛、跌打损伤等疾病。本文研究苦荞提取物对腹泻模型、便秘模型小鼠的影响,观察对胃肠运动双向调节作用,为苦荞临床应用提供实验依据。教育核心论文发表
1材料
1.1 动物 KM小鼠,雌雄兼用,体质量(20±2)g,由四川省医学科学院实验动物研究所提供,实验动物合格证号为:SCXK(川)2004-16。
1.2 药物 苦荞提取物制备:将带壳的苦荞籽(采自四川省凉山彝族自治州美姑县高寒山区,秋季成熟种子),60℃干燥,粉碎。65%的乙醇(固液比1∶14),80℃回流提取2次,每次1.5 h。合并两次滤液,减压浓缩,60℃烘干。每克提取物相当于5.28 g带壳苦荞籽生药。蓖麻油,成都普济医药化工有限公司产品。番泻叶,购自成都同仁堂药店,取100 g,粉碎,以8倍量水浸没药材,冷浸24 h,过滤后加入活性炭10 g,60℃水浴浓缩至1 g/ml[1] 。复方地芬诺酯,江苏平光制药有限责任公司产品(批号0709041)。麻仁丸,三九黄石制药厂产品(批号:070502)。活性碳粉:成都市科龙化工试剂厂(批号:20070326)。阿拉伯树胶粉,成都市科龙化工试剂厂产品(批号:20070507)。墨汁的配制( 10%阿拉伯胶的5%活性炭悬液)[2]:准确称取阿拉伯树胶100 g,加水800 ml,煮沸至溶液透明,称取活性碳( 粉状 )50 g加至上述溶液中煮沸3次,用玻棒搅拌混匀,待溶液凉后加水定容到1 000 ml,4℃冰箱保存,用前摇匀。
2 方法
2.1对腹泻小鼠影响
2.1.1 动物分组将KM小鼠50只,雌雄各半,随机分为空白对照组,模型组,苦荞提取物低、高剂量组,复方地芬诺酯组共5组,每组10只。空白组、模型组予等量生理盐水,苦荞提取物低、高剂量组分别予0.24,0.95 g/(kg·d),复方地芬诺酯组予50 mg/(kg·d),连续给药7 d。
2.1.2 对蓖麻油致腹泻小鼠的影响[3]末次给药前12 h禁食不禁水,末次给药后1 h,除空白组予等量生理盐水外每鼠ig蓖麻油0.15 ml,小鼠单笼观察,笼下铺置吸水滤纸做湿粪计数,以湿粪多少表示腹泻程度。每隔1 h换垫纸,观察4h内湿粪总数。
2.1.3 对番泻叶致腹泻小鼠的影响[3]分组给药同“2.1.1”项。末次给药前12 h禁食不禁水,末次给药后1 h,除空白组予等量生理盐水外各组小鼠每只灌服生番泻叶水提液( 1 g/ml)0.5 ml。观察4 h内湿粪总数。
2.2对便秘小鼠影响
2.2.1 动物分组将KM小鼠50只,雌雄各半,随机分为空白对照组,模型组,苦荞提取物低、高剂量组,麻仁丸组共5组,每组10只。空白组、模型组予等量生理盐水,苦荞提取物低、高剂量组分别予0.47,1.89 g/(kg·d),麻仁丸组予15 g/(kg·d),连续给药7 d。
2.2.2小肠推进率实验[4]末次给药前禁食不禁水16 h。除空白对照组给予等量生理盐水外,其余各组均灌胃给予复方地芬诺酯(5 mg/kg 体质量),给予复方地芬诺酯30 min后,各给药组分别给予含相应受试药物的墨汁,空白对照组、模型对照组给同体积的墨汁灌胃。墨汁灌胃25 min后,将50只小鼠脱颈椎处死,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管,轻轻将小肠拉成直线,测量肠管总长度,从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。按下式计算墨汁推进率:碳墨推进率(%)=墨汁推进长度(cm)/小肠总长度(cm)×100%。教育核心论文发表2.2.3小鼠排便实验[4]将KM小鼠50只,雌雄各半,分组、给药按“2.2.1”方法进行,末次给药前禁食不禁水16 h,模型对照组和各给药组予10 mg/kg复方地芬诺酯,空白对照组予等量生理盐水,给药30 min后各给药组分别给予含相应受试药物的墨汁,空白对照组、模型对照组给同体积的墨汁灌胃。从给墨汁开始观察并记录每只动物首次排黑便所需时间,给药后将小鼠置于铺有滤纸的观察笼中观察6 h,记录各小鼠在6 h内所排粪便粒数及重量。
2.3统计学处理 各组数据以±s表示,各组平均数间的差异采用t检验。
3结果
3.1对腹泻小鼠的影响由表1可知,蓖麻油模型组、番泻叶模型组与空白对照组相比有显著性差异,表明腹泻模型小鼠建立成功(P<0.001);与蓖麻油模型组、番泻叶模型组比较,苦荞提取物高、低剂量组用药4 h对腹泻模型小鼠的腹泻次数有显著性差异(P<0.05)。具有抗蓖麻油、番泻叶腹泻作用。表1苦荞提取物对蓖麻油、番泻叶致腹泻小鼠的止泻作用
3.2 对便秘小鼠小肠碳墨推进的影响 由表2可知,模型对照组与空白对照组相比有显著性差异,表明便秘模型小鼠建立成功(P<0.001);与模型组比较,苦荞提取物高、低剂量组对便秘模型小鼠的小肠蠕动有显著性差异,高剂量组差异极显著(P<0.01),低剂量组差异显著(P<0.05)。表2苦荞提取物对便秘小鼠小肠推进的影响
3.3 对便秘小鼠排便的影响 由表3可知,模型对照组与空白对照组相比,6h内首粒排便时间、排便粒数、排便重量有显著性差异,表明便秘模型小鼠建立成功(P<0.001);与模型组相比苦荞提取物高、低剂量组小鼠首次排便时间、粪便粒数和重量有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。表3苦荞提取物对便秘小鼠排便的影响教育核心论文发表
4讨论
腹泻是胃肠道机能障碍时的常见症状,其病理基础是肠黏膜炎症、水肿、肠道运动机能亢进。蓖麻油系刺激小肠而致泻,番泻叶系刺激大肠而致泻。本文研究表明苦荞提取物对蓖麻油、番泻叶所致小鼠稀便总数有增加有明显抑制作用,说明对蓖麻油水解成蓖麻酸后引起水和电解质转运发生改变的过分泌反应有抑制作用,对番泻叶引起的肠道蠕动与分泌增加有抑制作用。地芬诺酯是哌替啶的衍生物,为人工合成的止泻药。小鼠灌胃服用后,能提高肠张力,抑制肠蠕动,使肠内水分吸收增加,致使动物排便减少或排便困难,从而引起肠燥便秘。利用地芬诺酯模拟临床便秘模型是目前较理想,值得应用的动物便秘模型[5]。本实验研究表明苦荞提取物对地芬诺酯引起便秘模型小鼠具有促进小肠推进运动,缩短首次排便时间,并能增加排便粒数和重量的效应。以上表明,苦荞提取物对肠道不同状态具有调节作用,具有剂量差异性,进一步的机理尚需深入研究。研究结果可以为临床治疗腹泻、便秘提供依据。