壮药风车子化学成分的研究

使君子科植物主要分布于热带和亚热带地区，风车子属是该科中比较大的属之一，我国有6属约13种，分布于长江以南各省区，主产于广西、云南及海南岛。风车子别名水番桃，清凉树;拉丁名Combretum alfredii hance，是使君子科风车子属植物，生于海拔200～800 m的河边、谷底。风车子属植物的根、茎、叶、花和种子均可以作为药用部位。风车子根：甘、淡、微苦、平，清热利胆，用于黄疸;风车子叶：甘、淡、微苦、平，健胃、驱虫，用于蛔虫病、鞭虫病[1,2]。壮药风车子常被壮族用于治疗消化不良和小孩驱虫。目前其化学成分研究还未见报道，因此本文对它的叶进行化学成分研究，以填补该方面研究的空白。本实验从风车子的石油醚和醋酸乙酯部位共分离得到5个化合物。经理化性质鉴定、光谱分析及与文献光谱数据对比，分别为β-谷甾醇(β-sitosterol, I)，齐墩果酸(Oleanolic acid, Ⅱ)，熊果酸(Ursolic acid, Ⅲ)，β-胡萝卜苷(β-Carotene, Ⅳ)，槲皮素(Quercetin, V)。

　　1仪器与试剂

　　UV Agilent8453紫外-可见分光光度仪，NEXUS470型红外分光光度仪，Varian Inova-500型核磁共振仪，XT4-100A(控温型) 显微熔点测定仪。风车子采自广西忻城县，经广西中医学院药用植物教研室刘寿养副教授鉴定为使君子科，风车子属植物风车子的干燥叶，标本存于广西中医学院中药研究所。

　　2方法与结果

　　2.1提取与分离将风车子叶10 kg粉碎，用10倍药材量的75%乙醇热回流提取，减压回收溶剂，得到其粗提物浸膏;依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收得到相应的浸膏。再利用硅胶柱层析法、Sephadex LH-20柱层析、重结晶法对石油醚部位和醋酸乙酯部位进行分离纯化，得到化合物I~V。

　　2.2结构鉴定教育核心期刊论文发表

　　2.2.1化合物I白色针晶，m.p: 140~142℃，难溶于水、甲醇和乙醚，易溶于苯和氯仿。Liebermann-Burchard反应阳性及氯仿-浓硫酸反应阳性。与已知对照品β-谷甾醇共薄层，经3种不同的展开系统展开(张晓媛.河北香菊化学成分的研究：河北医科大学论文集，2007)，其Rf 值和对照品一致。与对照品混合测定熔点不下降。因此鉴定化合物I为β-谷甾醇。

　　2.2.2化合物II白色粉末，易溶于氯仿，不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮。Libermann-Burchard反应呈阳性。IRγKBrMAX(cm-1): 2 942, 1 459, 1 386, 1 696, 1 182, 1 030。1H-NMR(500 MHz, CDCl3) δ: 5.27 (1H, m, H-12), 3.25(1H, t, H-3), 2.22 (1H, dd, H-18), 1.54(3H, s, Me-27), 0.79(3H, s, Me-23), 0.87(3H, s, Me-24),0.95(3H, s, Me-25) 0.97(3H, s, Me-26), 1.01(3H, s, Me-29), 1.10(3H, s, Me-30)。将此化合物与齐墩果酸标品共薄层[3]Rf 值及显色情况与齐墩果酸完全一致。光谱数据与文献[3]报道的齐墩果酸的光谱数据基本一致，故鉴定化合物Ⅱ为齐墩果酸。

　　2.2.3化合物Ⅲ

　　白色粉末，易溶于吡啶，溶于甲醇、乙醇，略溶于丙酮，微溶于苯和氯仿、乙醚不溶于水和石油醚。Libermann-Burchard反应呈阳性。IRγKBrMAX KBr(cm-1): 2 926, 2 870, 1 457, 1 386, 1 693, 1 275, 1 030。1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ: 5.31(1H, s, H-12), 3.24(1H, t, H-3), 2. 83 (3H, d, H-18), 0.92(3H, d, H-30), 0.95(3H, d, H-29), 0.79 (3H, s)，1.01(3H, s), 1.15 (3H, s), 1.27 (3H, s), 1.30(3H, s)。将此化合物与熊果酸的标准品共薄层，经3种不同的展开系统展开[3]，其Rf 值和对照品一致。光谱数据与文献[4]报道的熊果酸的光谱数据基本一致。故鉴定化合物III为熊果酸。

2.2.4化合物Ⅳ白色粉末，mp: 291~292 ℃, Liebermann-Burchard反应阳性;氯仿-浓硫酸反应阳性;Molish反应：阳性。与已知对照品β-胡萝卜苷共薄层，用3种溶剂系统为展开剂进行展开[5]：其Rf 值和对照品β-胡萝卜苷一致，与对照品混合测定熔点不下降，故鉴定化合物IV为β-胡萝卜苷。

　　2.2.5化合物V黄色粉末，mp:313~314℃, 盐酸-镁粉反应呈阳性。IRγKBrMAX(cm-1): 3 285, 1 666, 1 604, 1 502, 1 457, 1 067, 1 200。 1H-NMR(500 MHz, DMSO)δ: 12.5, 10.79, 9.60, 9.38, 9.32(eachH, S, 5×OH)，6.18(1H, d, J=2.0 Hz, H-6), 6.41(1H, S, J=2.0 Hz, H-8), 6.87(1H, d, J=8.0 Hz, H-5′), 7.55(1H, dd, J=2.0, 8.0 Hz, H-6′), 7.68(1H, d, J=2.0 Hz, H-2′)。 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ: 93.8(C-8), 98.6(C-6), 103.4(C-10), 115.5(C-2′), 116.0(C-5′), 120.4(C-6′), 122.4(C-1′), 136.1(C-3), 145.5(C-3′), 147.2(C-2), 148.1(C-4′), 156.6(C-9), 161.1(C-5), 164.3(C-7), 176.3(C-4)。以上论文谱数据均与文献报道[6，7]槲皮素的光谱数据一致，故鉴定化合物V为槲皮素。教育核心期刊论文发表

　　3讨论

　　本论文对华风车子的化学成分进行了系统研究，运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、重结晶等多种手段，共分离得到5个化合物，通过理化数据测定、波谱数据分析等手段，鉴定了其结构。文献[8]报道风车子属植物具有较好的抗肿瘤活性，本文结果对阐明华风车子的化学成分和进一步探讨其抗肿瘤作用机制具有重要意义。