奚氏痛风灵2号对慢性高尿酸血症肾病大鼠尿酸代谢的影响

奚氏痛风灵系列方剂是奚九一教授几十年临床经验的结晶，在临床治疗中取得满意疗效。奚氏痛风灵治疗慢性尿酸性肾病已作临床报道[1]。本实验采用随机、双盲、对照的方法，设立痛风利仙对照组、模型对照组、正常空白对照组与奚氏痛风灵2号进行比较，探讨其对血尿酸的影响机制及应用价值，以期在临床得到广泛推广。

    1  材料与方法

    1.1  实验材料

    1.1.1  动物  清洁级SD雄性大白鼠70只，体重（200±20）g，由上海西普尔－必凯实验动物有限公司提供。

    1.1.2  药物  痛风灵2号方主要由制首乌15g、仙茅15g、炒白术15g、威灵仙20g、益母草15g等组成，于上海中西医结合医院脉管病研究所配制成含生药1.09g/mL的浓缩水煎剂。痛风利仙（苯溴马龙片,德国赫曼大药厂,国药准字J20040001）碾碎后溶于蒸馏水配制成1mL含痛风利仙0.45g的水溶剂。

    1.2  实验方法

    1.2.1  模型制作  参照奚九一等[2]方法制作大鼠高尿酸血症肾病的动物模型。

    1.2.2  分组与给药  将清洁级SD实验大鼠随机分为4组：对照组（10只）、模型组（20只）、痛风灵治疗组（20只）、痛风利仙对照组（20只）。各组按造模成功后药物治疗时间的不同又分别分为用药14天组和用药35天组，每组各10只。按照体表面积-剂量换算法公式计算[3]大鼠给药量。中药治疗组每天每只大鼠给予痛风灵2号浓缩水煎剂10mL/kg灌胃；痛风利仙对照组每天每只大鼠给予痛风利仙水溶剂10mL/kg灌胃；对照组和模型组每日灌以等量蒸馏水。对照组和14天各组观察14天后处死；35天各组观察35天后处死。

    1.2.3  生化指标测定  采用酶法用RXL型自动生化仪（美国德灵生产）检测血尿酸（serum Uric Acid,sUA）、尿酸肾脏清除率、尿尿酸（urine Uric Acid，uUA）,采用苦味酸法检测血清肌酐（sCr），比色法测定血清黄嘌呤氧化酶抑制剂（serum Xanthine Oxidase,sXOD）活性。

    1.2.4  肾脏尿酸清除率（Renal Excretive Rate,RER）的计算

    尿酸清除率（mL/min）=尿酸每分钟在尿中的排出量/尿酸血浆浓度

    1.3  肾组织形态观察  取各大鼠双肾，生理盐水漂洗，滤纸吸干，称重后将右肾纵行剖开，一半放入10％福尔马林固定液中，另一半放入无水乙醇中，24小时后逐级酒精脱水、二甲苯透明、58℃石蜡包埋，5μm厚切片，HE染色。光镜下观察肾组织形态结构变化。

    1.4  资料统计分析  数据均以均数±标准差（x±s）表示，两样本均数比较采用t检验。多样本均数比较采用单因素方差分析，均由SPSS11.5软件完成。
2  结果

    2.1  各项生化指标的变化  痛风灵组、痛风利仙组sUA均低于模型组，14天时痛风利仙组sUA值低于痛风灵组，而35天时两组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；痛风利仙组与痛风灵组RER值均高于模型组,14天时两组RER值差异无统计学意义(P＞0.05)，35天时痛风利仙组RER值高于痛风灵组。见表1。 表1  治疗后各组间血清UA、RER值比较

    模型35天组sXOD、模型14天及35天组sCr、痛风利仙35天组sXOD、痛风利仙14天及35天组sCr均高于对照组；痛风灵35天组sXOD及sCr、痛风利仙35天组sCr均高于模型组；痛风利仙35天组sXOD及sCr、模型35天组sXOD及sCr均高于痛风灵组。见表2。论文代发表

    2.2  肾组织形态学变化  模型组肾小管和间质内有大量的棕褐色尿酸盐结晶沉积，小管上皮细胞出现萎缩、互相融合，管腔扩大，小管间质周围局灶性炎性细胞浸润，小管、间质内广泛的毛细血管充血，可见间质水肿。正常组无上述改变。中药14天组：肾小管及间质内未见尿酸盐结晶沉积，肾小管上皮细胞排列整齐、未见萎缩，小管轻度扩张，间质无肿胀，有少量的局灶性炎性细胞浸润及间质充血。中药35天组：无尿酸盐结晶沉积，仅部分视野见个别小管轻度扩张。痛风利仙组：肾小管和间质内有棕褐色尿酸盐结晶沉积，小管和间质损伤严重，上皮细胞互相融合、萎缩，管腔扩张，间质水肿，广泛的炎性细胞浸润，小管和间质内广泛性毛细血管扩张，35天时肾小管内大片尿酸结晶，有肾小管堵塞现象。表2  治疗后各组间血清XOD活性、血清Cr值比较

    3  讨论

    　　UN是由于慢性高尿酸血症造成的尿酸钠盐在肾小管及肾间质沉积，并引起炎症反应。UN呈慢性发展过程，肾损害的严重程度与血尿酸的严重程度和持续时间呈正相关。因此控制高尿酸血症是防治高尿酸血症肾病、肾功能减退的重要措施[3]。

    尿酸是嘌呤代谢的最终产物，无论体内细胞核蛋白还是摄入的动物性或其他含嘌呤丰富的食物，在体内均需通过一系列酶水解作用而被分解，最终生成尿酸。目前比较确切的XOD的生理功能是参与核酸代谢，作为一种非特异的需氧脱氢酶可作用于各种底物，如嘌呤、嘧啶、蝶啶、杂环碱脂肪酸及磷脂等，其中以黄嘌呤和次黄嘌呤为主，对其催化反应速度也最快。它通过对次黄嘌呤、黄嘌呤的逐级分解，最后生成尿酸。XOD活性的高低直接影响着血中尿酸的多少。人体产生的尿酸大部分经肾随尿排出。因此尿酸生成过多或肾脏排泄尿酸减少，是血清尿酸值升高的重要机制。通过抑制XOD活性或（和）促进肾脏排泄尿酸可以降低血尿酸。

    排尿酸药痛风利仙和抑制尿酸生成药别嘌呤醇可以有效降低血尿酸值，是治疗高尿酸血症的常用药。但服用痛风利仙后，尿酸排出量增加，肾小管尿酸浓度升高，易于形成尿酸结晶沉积于肾小管内，加重肾脏损害，所以在肾功能不全时不宜使用此类药物[4]。而别嘌呤醇在有效治疗高尿酸血症的同时，也有诸多不良反应产生，如药疹、血液系统反应、周围神经炎、肝肾功能损害，严重者发生多系统、多脏器损害，甚至死亡。因此治疗高尿酸血症新药物的出现，将给广大痛风患者带来福音。本实验发现，中药复方制剂奚氏痛风灵2号可以通过促进尿酸排泄和抑制XOD的双重作用降低sUA，同时有改善肾功能的作用，尤其适用于高尿酸血症肾病的治疗。虽然短时间内痛风灵2号降低血尿酸的作用较痛风利仙差，对促进尿酸的排泄作用也弱于痛风利仙，但从长时间的治疗效果来看，痛风灵2号方还有抑制sXOD的作用，总体降sUA的作用与痛风利仙相似。同时还观察到痛风灵2号有降低sCr、改善肾功能的作用。论文代发表

    奚氏痛风灵2号以健脾益肾，祛湿化痰为法则，方中制首乌补益精血，仙茅温肾壮阳，祛寒除湿，白术补气健脾，燥湿利水。现代药理研究证明以上3种药物均具增强免疫功能作用。以此3药为君，可达补肾精，温肾阳，健脾除湿之效。威灵仙祛风湿，通经络，止痹痛，治骨鲠，消痰水，具有降血压、降血糖、降低血清胆固醇作用；益母草利尿消肿，活血化淤，可防治急性肾小球坏死，明显降低血尿素氮，减轻肾组织损伤。二药共为臣药，共奏软坚化痰，促尿酸排泄，保护肾功能作用。佐以鸡内金以消食导滞，促进脾胃运化。本实验的发现为痛风病新药的开发奠定良好的基础。

    第2期王  瑾，等.奚氏痛风灵2号对慢性高尿酸血症肾病大鼠尿酸代谢的影响